案例一：PSN-PEG-pLys(cbz)的合成，无水 DMSO 作为反应溶剂
为了合成PSN-PEG-pLys（cbz），将N3-PEG-pLys（cbz）（200 mg，0.024 mmol）、PSN肽（50.75 mg，0.05）、CuI（4 mg，0.02 mmol）和PMDETA（10 mg，0.058 mmol）溶解在无水DMSO（5 mL）中，在氩气氛围的室温下置于黑暗中24小时。再将混合物分别用EDTA-2Na溶液（300 mmol，5L）和H2O透析48小时，然后冷冻干燥以获得白色粉末形式的PSN-PEG-pLys。
需要注意的是：CuI为催化剂，通过透析去除催化剂。
案例二：Post-Liposomal Modification，HEPES buffer水溶液作为反应溶剂
对于CuAAC反应混合脂质体，DOPG/(C18)2-Peg9-N3（以92:8摩尔比）和DOPG/(C18)2-Peg9-N3/(C18)2-L5-SS-CCK8（以87:8:5摩尔比），在pH为7.4的10mM HEPES缓冲液中的3M脂质浓度。然后，1.0当量的肽衍生物（R8-Pra（2a）或2.0当量的R8-PraFITC（2c）），0.5当量抗坏血酸钠，加入相对于叠氮基部分的CuCl2。将反应混合物在40℃下搅拌30分钟，然后在室温下保存过夜。使用Sephadex G-50柱通过凝胶过滤色谱法去除游离肽和铜离子。对于马来酰亚胺(-MAL)和巯基(−SH）混合脂质体之间的反应，在pH为7.4的10 mM HEPES缓冲液中以1.10−3 M脂质浓度下，制备DOPG/DPE-Peg2000-Mal（以92:8摩尔比）和DOPG/DSE-Peg2000-Mal/（C18）2-L5-SS-CCK8（以87:8:5摩尔比）。然后，加入110µl肽衍生物（R8-Cys（2b）或R8CysFITC（2d））的储备溶液(1mg /ml HEPES)，并在室温下搅拌反应1小时。如前文所述，消除游离肽。
需要注意的是：CuCl2为催化剂，通过 G-50 凝胶柱去除催化剂和未反应的多肽。
案例三：N3 叠氮基团和 DBCO 反应形成凝胶
链霉亲和素水凝胶的构建
通过使N3-NHS或DBCO-NHS与四个支链氨基PEG反应，用PEG修饰叠氮基或DBCO基。四支链氨基PEG在末端具有四个氨基，氨基反应NHS基团用于在四支链氨基聚乙二醇的四个末端引入N3基团或DBCO基团。SA-N3溶液（32µM，100µL），N3-PEG（167 mg mL−1，30µL）和DBCO-PEG（167 mg mL−1，30µL）在RT下混合1小时以形成水凝胶。使用Paar Physica MCR-301平行板流变仪（Anton Paar，Ashland，VA，USA）和25mm板夹具（PP25）进行流变仪测量。
需要注意的是：N3 和 DBCO 反应未加入催化剂
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